今天我給大家講講LB培養(yǎng)基的性能測(cè)試：
1、外觀控制
制備好的LB培養(yǎng)基應(yīng)有相應(yīng)的顏色，一般的培養(yǎng)基應(yīng)澄清、無渾濁、無沉淀。使用前應(yīng)檢查培養(yǎng)基的顏色是否發(fā)生變化，是否蒸發(fā)/脫水。
2、污染控制
從每批制備好的LB培養(yǎng)基中選取部分進(jìn)行污染測(cè)試(空白試驗(yàn))，確定無微生物生長(zhǎng)方可使用。
3、性能測(cè)試
(1)測(cè)試菌株選擇：測(cè)試菌株是具有其代表種的穩(wěn)定特性并能有效證明實(shí)驗(yàn)室特定培養(yǎng)基z佳性能的一套菌株，應(yīng)來自/國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)菌種保藏中心ATCC標(biāo)準(zhǔn)菌株或其他有證書的菌株。
(2)定量測(cè)試方法：改良Miles-Misra法。測(cè)試菌株過夜培養(yǎng)物10倍遞增稀釋;測(cè)試平板和參照平板劃分為4個(gè)區(qū)域并標(biāo)記;從z高稀釋度開始，分別滴一滴稀釋液于試驗(yàn)平板和對(duì)照平板標(biāo)記好的區(qū)域;將稀釋液涂滿整個(gè)1/4區(qū)域，37°C培養(yǎng)18小時(shí);對(duì)易計(jì)數(shù)的區(qū)域計(jì)數(shù)，按公式計(jì)算生長(zhǎng)率(生長(zhǎng)率=待測(cè)培養(yǎng)基平板上得到的菌落總數(shù)/參考培養(yǎng)基平板上獲得的菌落總數(shù))。非選擇性培養(yǎng)基上目標(biāo)菌的生長(zhǎng)率應(yīng)不低于0.7，該類培養(yǎng)基應(yīng)易于目標(biāo)菌生長(zhǎng);選擇性培養(yǎng)基上目標(biāo)菌的生長(zhǎng)率應(yīng)不低于0.1 。
(3)半定量測(cè)試方法：改進(jìn)的劃線法接種法。平板分ABCD四區(qū)，共劃16條線，平行線大概相隔0.5cm，每條有菌落生長(zhǎng)的劃線記作1分，每個(gè)僅一半的線有菌落生長(zhǎng)記作0.5分，沒有菌落生長(zhǎng)或生長(zhǎng)量少于劃線的一半記作0分，分?jǐn)?shù)加起來得到生長(zhǎng)指數(shù)G。目標(biāo)菌在培養(yǎng)基上應(yīng)呈現(xiàn)典型的生長(zhǎng)，而非目標(biāo)菌的生長(zhǎng)應(yīng)部分或*被抑制，目標(biāo)菌的生長(zhǎng)指數(shù)G大于6時(shí)，培養(yǎng)基可接受 。
(4)定性測(cè)試方法 ：平板接種觀察法。用接種環(huán)取測(cè)試菌培養(yǎng)物，在測(cè)試培養(yǎng)基表面劃平行直線。按標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的培養(yǎng)時(shí)間和溫度對(duì)接種后的平板進(jìn)行培養(yǎng)，目標(biāo)菌應(yīng)呈現(xiàn)良好生長(zhǎng)，并有典型的菌落外觀、大小和形態(tài)，非目標(biāo)菌應(yīng)是微弱生長(zhǎng)或無生長(zhǎng) 。
