索萊寶索萊寶產(chǎn)品覆蓋:生化試劑、蛋白與免疫、多肽、抗體、ELISA、流式分析、分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、小分子化合物、生化試劑盒、染色試劑、分析標(biāo)準(zhǔn)品、微生物培養(yǎng)、層析介質(zhì)、磁珠、儀器和耗材、納米材料、化學(xué)合成等 蝦堿性磷酸酶(SAP)
產(chǎn)品分類(lèi)
產(chǎn)品介紹
蝦堿性磷酸酶催化DNA和RNA的5’和3’磷酸單脂的去磷酸化反應(yīng),也可水解核糖和脫氧核糖核苷三磷酸(NTP和dNTP)。該磷酸酶在分子生物學(xué)研究中應(yīng)用廣泛,如去除DNA和RNA末端的磷酸基團(tuán),用于后續(xù)的克隆和探針末端標(biāo)記。在克隆中,可使線性載體去磷酸化,防止自連。蝦堿性磷酸酶在65°C溫育5分鐘即可完全的、不可逆的失活,因此,在連接或末端標(biāo)記之后,可以不用去除熱敏磷酸酶?;谝陨咸匦裕撁甘莻鹘y(tǒng)去磷酸化酶--小牛腸堿性磷酸酶(CIP)的絕佳替代物。 酶活/效價(jià):實(shí)際酶活以標(biāo)簽信息為準(zhǔn)。
應(yīng)用
1.DNA和RNA的去磷酸化
2.防止克隆載體的自連
3.制備5′末端標(biāo)記模板
4.去除PCR產(chǎn)物中的dNTP和焦磷酸鹽
注意事項(xiàng)
(1)1×SAPBuffer:50mMBis-TrisHClpH6.0,1mM
MgCl2,0.1mMZnCl2,25°C溫育。
(2)熱失活:65°C加熱5分鐘,不可逆失活。該酶通常用
于酶切載體的去磷酸化,因其不可逆熱失活特性。當(dāng)完成去磷酸化反應(yīng)后,無(wú)需再純化產(chǎn)物,可以直接用于后續(xù)連接反應(yīng)。
(3)蝦堿性磷酸酶也可以用來(lái)降解PCR反應(yīng)中的游離dNTP,用于制備測(cè)序模板和SNP分析。同樣無(wú)需純化,可直接用于下游實(shí)驗(yàn)。
蝦堿性磷酸酶(SAP)
蝦堿性磷酸酶(SAP)
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